PCR實(shí)驗室標準

基因擴增實(shí)驗又稱(chēng)PCR實(shí)驗，其特點(diǎn)是能將微量的DNA大幅增加，PCR是分子生物學(xué)研究和實(shí)驗的常規方法,廣泛應用于生物學(xué)各個(gè)領(lǐng)域，如：檢驗艾滋病、乙型肝炎、禽疫病，癌基因的檢測和診斷，DNA指紋、個(gè)體識別、親子鑒別及法醫物證，動(dòng)、植物檢疫，動(dòng)物及其衍生產(chǎn)品檢測，動(dòng)物飼料、化妝品、食品衛生檢測，轉基因作物與轉基因微生物檢測等。
 
PCR設計依據
《醫療機構臨床基因擴增管理法》
《生物安全實(shí)驗室建筑技術(shù)規范》 GB50346-2004
《潔凈廠(chǎng)房設計規范》GB50073-2001
《高效空氣過(guò)濾器》GB13554-92
《實(shí)驗室生物安全通用要求》GB19489-2004
《微生物和生物醫學(xué)實(shí)驗室生物安全通用準則》WS233-2002 中華人民共和國衛生部
 
PCR實(shí)驗室平面布局
基因擴增實(shí)驗室又稱(chēng)PCR實(shí)驗室，實(shí)驗室原則上分為四個(gè)單獨的工作區域，前兩區為擴增前區，后兩區為擴增后區。擴增前區與擴增后區應嚴格分開(kāi)。實(shí)驗材料、試劑、記錄紙、筆、清潔材料等，只能從擴增前區流向擴增后區，即從試劑準備區->樣品處理區->擴增區->擴增產(chǎn)物分析區，不得逆向流動(dòng)。實(shí)驗室的氣流也應從擴增前區流向擴增后區，不得逆向流動(dòng)。各工作區域應設置緩沖間，工作間與緩沖間之間宜安裝連鎖裝置。不同功能的核酸檢驗工作區應是分隔獨立的工作室，并有明顯的標志，各區間不能直通。各區之間如果是緊密相連，需安裝物品傳遞窗。每個(gè)工作區域的頂部應安裝紫外燈，紫外燈的波長(cháng)為254 nm，安裝數量為每20 m2安裝一支40W的紫外燈。
 
實(shí)驗室較為理想的布局模式為有一個(gè)專(zhuān)用走廊，試劑準備區、標本制備區、擴增區和產(chǎn)物分析區很規范地排列在一起，前三個(gè)區各有一個(gè)緩沖間，可供換工作服和工作鞋使用，頂上可裝一紫外燈。內實(shí)驗區域設為正壓或常壓狀態(tài)，緩沖間內設為負壓狀態(tài)（可上設一抽風(fēng)裝置），使這三個(gè)區的空氣流向為由實(shí)驗區域內向外，緩沖間內通向內實(shí)驗室和走廊的門(mén)可安裝一種連鎖裝置，當一個(gè)門(mén)打開(kāi)時(shí)，另一門(mén)必須處于關(guān)閉狀態(tài)，防止出現兩個(gè)門(mén)同時(shí)打開(kāi)的情況。產(chǎn)物分析區可不設緩沖間，但應設為負壓狀態(tài)（裝一個(gè)排風(fēng)扇即可），使空氣流向由外向內，以防止擴增產(chǎn)物的隨空氣流出。每一區域都須有明確的標記，工作按試劑準備區、標本制備區、擴增區至產(chǎn)物分析區單一流向進(jìn)行，各區的儀器設備包括工作服、鞋、實(shí)驗記錄本和筆等都必須專(zhuān)用。
如果無(wú)法作到以上模式，以下基本要求必須做到：
1.四個(gè)區域必須是相互獨立的；
2.各區的儀器設備及各種物品必須是專(zhuān)用的；
3.各區完全獨立，緩沖間可有可無(wú)。如為一個(gè)區套一個(gè)區的模式，區間不能直通，應有緩沖間，供換工作服及鞋子用，并保證兩個(gè)區域間始終處于完全的分隔狀態(tài)；
4.產(chǎn)物分析區應安裝排風(fēng)扇或其它抽風(fēng)裝置，維持負壓。
 
實(shí)驗室空調通風(fēng)系統設計及壓力控制
各個(gè)區域之間應具備單向的實(shí)驗工藝流、物流、人流與氣流，形成單向流程的保護屏障，避免實(shí)驗之間的相互干擾，防止核酸氣溶膠對實(shí)驗過(guò)程造成污染產(chǎn)生假性結果。PCR實(shí)驗室并沒(méi)有嚴格的凈化要求，但是為避免各個(gè)實(shí)驗區域間交叉污染的可能性，宜采用全送全排的氣流組織形式。同時(shí)，要嚴格控制送、排風(fēng)的比例以保證各實(shí)驗區的壓力要求。
 
實(shí)驗室裝修
實(shí)驗室的墻體，包括頂棚，應結構牢固、氣密性好；所有陰角宜采用圓弧形線(xiàn)條過(guò)渡；墻體內壁光潔、不吸附、耐腐蝕、易清洗消毒；地面材料應滿(mǎn)足無(wú)縫隙、無(wú)滲漏、光潔、耐腐蝕的要求。